β-內(nèi)酰胺酶是金黃色葡萄球菌和淋球菌等多種細(xì)菌產(chǎn)生的一種抗生素滅活酶，能裂解青霉素和頭孢菌素等β-內(nèi)酰胺類抗生素的β-內(nèi)酰胺環(huán)，使其變成無(wú)抗菌活性的物質(zhì)，從而表現(xiàn)為產(chǎn)酶細(xì)菌對(duì)這類抗生素耐藥。由于β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)速度快，所以檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶與常規(guī)藥敏實(shí)驗(yàn)相比，能更快地獲得結(jié)果。檢測(cè)β-內(nèi)酰胺酶的方法有酸度法和碘測(cè)定法。
內(nèi)酰胺酶檢測(cè)方法主要包括以下幾種：
1.紙片擴(kuò)散法：將含有β-內(nèi)酰胺類抗生素的紙片放置在含有細(xì)菌的瓊脂平板上，通過觀察紙片周圍的溶解區(qū)域大小和形狀，判斷細(xì)菌是否產(chǎn)生內(nèi)酰胺酶。
2.酶活性測(cè)定法：通過檢測(cè)含有β-內(nèi)酰胺類抗生素的溶液中的內(nèi)酰胺酶活性，判斷細(xì)菌是否產(chǎn)生內(nèi)酰胺酶。
3.分子生物學(xué)檢測(cè)法：通過PCR技術(shù)擴(kuò)增內(nèi)酰胺酶基因，檢測(cè)細(xì)菌是否攜帶內(nèi)酰胺酶基因。
在臨床應(yīng)用中，紙片擴(kuò)散法是常用的方法，因?yàn)槠洳僮骱?jiǎn)單、成本低、結(jié)果明顯易讀。但是，該方法存在著假陰性和假陽(yáng)性的問題，需要結(jié)合臨床表現(xiàn)和病原學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析。
酸測(cè)量法：青霉素被β-內(nèi)酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降到6.8以下，用酚紅指示劑，由紅(紫)色(原液：枸櫞酸緩沖液pH8.5)→黃色(pH6.8以下)；淀粉-碘測(cè)定法：β內(nèi)酰胺酶破壞β內(nèi)酰胺環(huán)，碘與被打開β內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)合，使藍(lán)色的淀粉-碘復(fù)合物轉(zhuǎn)變成無(wú)色。β-內(nèi)酰胺酶是多種不同類型以β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物為底物的降解酶，通過水解β-內(nèi)酰胺環(huán)造成β-內(nèi)酰胺類藥物失去活性，將待測(cè)菌與頭孢硝噻吩作用一定時(shí)間后，如待測(cè)菌產(chǎn)生青霉素酶，則可水解頭孢硝噻吩的β-內(nèi)酰胺環(huán)，顏色由黃色變?yōu)榧t色。
總的來(lái)說(shuō)，內(nèi)酰胺酶檢測(cè)對(duì)于臨床合理用藥和預(yù)防細(xì)菌耐藥性的發(fā)生具有重要意義。臨床醫(yī)生需要根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，結(jié)合患者的病情和藥物使用史，選擇合適的抗生素治療方案，減少藥物的濫用和耐藥性的發(fā)生。
更新時(shí)間：2024-03-15 
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